Zawartość
- Mikroskopia świetlna i biologia komórki
- Opracowano dziesiątki procedur eksperymentalnych
- Plamy chemiczne i mikroskopia świetlna
- Łatwość powiększania
- Zalety mikroskopii fluorescencyjnej
- Wada mikroskopów świetlnych
Mikroskop świetlny lub mieszany jest narzędziem, z którym może spotkać się każdy student biologii. Zrozumienie zalet mikroskopu świetlnego da wgląd w opanowanie jego przydatności w klasie lub klinice. Liczne techniki eksperymentalne, które zostały udoskonalone do użycia za pomocą mikroskopu świetlnego, jego łatwość użycia i względnie przystępna cena w porównaniu z innymi typami mikroskopów sprawiają, że jest to preferowany wybór do wielu zastosowań w naukach przyrodniczych.
Mikroskopia świetlna i biologia komórki
Ponieważ komórek nie można oglądać gołym okiem, mikroskopia jest kluczowym elementem w badaniu struktury i funkcji komórek. Mikroskop świetlny wykorzystuje źródło światła do oświetlania próbki na jasnym polu. Próbka jest barwiona, aby struktury, które są zwykle półprzezroczyste lub prawie bezbarwne, były ciemniejsze niż tło i łatwiejsze do zauważenia. Inną techniką mikroskopii jest mikroskopia fluorescencyjna. Zamiast używać ciemnej plamy na jasnym tle, komórki są barwione fluorescencyjnymi barwnikami i oglądane na ciemnym tle.
Opracowano dziesiątki procedur eksperymentalnych
Badanie tkanek za pomocą mikroskopii świetlnej jest praktykowane od ponad 50 lat. Mikroskopia świetlna jest najbardziej dostępną formą mikroskopii na świecie i wciąż jest jednym z głównych narzędzi szkoleniowych dla patologów lub lekarzy, którzy diagnozują choroby poprzez badanie mikroskopijnej struktury tkanki. Tysiące laboratoriów na całym świecie udoskonaliło dziesiątki procedur eksperymentalnych, a wiele z nich jest dostępnych bezpłatnie. Połączenie niskiego kosztu i dużej ilości informacji biologicznych dostarczanych przez mikroskop świetlny czyni go nieocenionym narzędziem w badaniach i medycynie.
Plamy chemiczne i mikroskopia świetlna
Obserwacja próbki pod mikroskopem świetlnym wymaga pomocy kolorowych plam chemicznych. Te niebieskie, czerwone, zielone i brązowe plamy są przymocowane do tkanki za pomocą klarownej substancji chemicznej zwanej permount, która twardnieje pod wpływem powietrza. Tak połączone plamy chemiczne i tkanki utrzymują się przez wiele lat bez blaknięcia, umożliwiając naukowcom badanie tego samego okazu przez długi czas bez utraty koloru. Utrata widoczności jest ograniczeniem mikroskopii fluorescencyjnej, ponieważ barwniki fluorescencyjne zanikają z czasem.
Łatwość powiększania
Zdolność mikroskopu złożonego do łatwego przybliżania między obserwowaniem ogona małej ryby w 50-krotności jego rzeczywistego rozmiaru, a obserwowaniem tętnic w ogonie przy 400-krotności rzeczywistej wielkości nie jest porównywalna z innymi typami mikroskopów. Patologowie badają biopsje lub małe fragmenty tkanki usuwane za pomocą igły pod mikroskopem złożonym i często powiększają i pomniejszają, aby dokonać najlepszej oceny. Złożony mikroskop świetlny pozostaje najlepszą opcją dla tego typu badań.
Zalety mikroskopii fluorescencyjnej
Mikroskopia fluorescencyjna zapewnia widzowi więcej szczegółów wizualnych, ponieważ barwniki fluorescencyjne mogą celować w określone struktury w komórce. Fluorescencyjne cząsteczki w próbce komórkowej zwane fluoroforami pochłaniają światło o jednej długości fali i emitują światło o innej długości fali. Barwniki fluorescencyjne można stosować ze specyficznymi białkami i przeciwciałami w celu podkreślenia struktur, a nawet pojedynczych cząsteczek w komórce. Techniki mikroskopii fluorescencyjnej pozwalają na zastosowanie wielu barwników w próbce.
Wada mikroskopów świetlnych
Technologia mikroskopii eksplodowała w ostatnich dziesięcioleciach, a niektóre bardziej zaawansowane mikroskopy zapewniają bardziej szczegółowe informacje niż klasyczny mikroskop złożony (lekki). Mikroskopy fluorescencyjne pozwalają naukowcom zobaczyć dwa różne białka w tym samym miejscu w komórce przy użyciu czerwonych i zielonych znaczników, które nakładają się na siebie, tworząc żółty kolor. Mikroskopy elektronowe pokazują trójwymiarowe cechy powierzchni komórek. Aby wymienić jedną wadę mikroskopu świetlnego, nie posiada on niektórych zaawansowanych możliwości mikroskopii fluorescencyjnej lub elektronowej, ponieważ wykorzystuje tylko białe światło. Jednak mikroskopy elektronowe i mikroskopy fluorescencyjne są w cenie od dziesiątek tysięcy do setek tysięcy dolarów, podczas gdy mikroskop złożony można obecnie kupić za jedyne 100 USD.