Chromatografia jest procesem stosowanym w nauce do rozdzielania mieszanin. Podstawową zasadą chromatografii jest to, że różne związki o różnych rozmiarach będą przechodzić przez bariery przy różnych prędkościach. W wysokociśnieniowej chromatografii cieczowej (HPLC) związek wstrzykuje się przez kolumnę perełek różnej wielkości. Mniejszy związek przechodzi przez kolumnę szybciej niż większy związek. Czas potrzebny na przejście związku przez kolumnę to czas retencji (RT). Względny czas retencji (RRT) to porównanie RT jednego związku z drugim.
Znajdź główny pik na HPLC. Główny pik będzie największym i najbardziej widocznym pikiem na wyjściu.
Przeczytaj RT głównego piku. Można to odczytać, patrząc na moment rozpoczęcia i zakończenia szczytu. Jeśli szczyt zaczyna się po 6,5 minuty, a kończy po 9,5 minuty, wówczas RT wynosi 3 minuty.
Znajdź szczyt zainteresowania. Może to być każdy pik, który chcesz obliczyć RRT. Przeczytaj RT tego piku. Jeśli pik zaczyna się po 1 minucie i kończy po 2,5 minutach, wówczas RT wynosi 1,5 minuty.
Podzielić RT piku będącego przedmiotem zainteresowania przez RT piku głównego, aby znaleźć RRT piku będącego przedmiotem zainteresowania. W naszym przypadku byłoby to 1,5 minuty / 3 minuty lub 0,5.