Krzywe kalibracyjne służą do określania stężenia nieznanych substancji na podstawie wcześniejszych pomiarów roztworów o znanych stężeniach. Precyzja i dokładność pomiarów zależą od krzywej kalibracji. Im lepsza krzywa, tym dokładniejsza odpowiedź, tym gorsza krzywa, tym gorsza dokładność. Jest to rodzaj metody porównawczej, nieznana porównywana jest do znanej.Krzywe kalibracyjne są stosowane do wszystkich rodzajów pomiarów na wielu różnych maszynach. W tym przykładzie użyto spektrofotometru.
Rozcieńczyć roztwór standardowy do różnych stężeń. Zazwyczaj wykonuje się 10-krotne rozcieńczenie, 20-krotne rozcieńczenie, 30-krotne rozcieńczenie lub inny krokowy roztwór. Wykonaj każde rozcieńczenie dwukrotnie, aby wszystkie próbki były w dwóch egzemplarzach.
Obliczyć stężenia rozcieńczonych roztworów. Przykładem nowego stężenia dla 10-krotnego rozcieńczenia byłoby stężenie pierwszego roztworu pomnożone przez 0,10.
Odczytaj chłonność rozcieńczonych roztworów na spektrofotometrze. Włóż kuwetę do spektrofotometru, aby trójkątne oznaczenie było wyrównane ze ścieżką światła. Zamknij pokrywę spektrofotometru i naciśnij przycisk zerowania. Zeruj maszynę wodą destylowaną co pięć próbek. Po wyzerowaniu urządzenia odczytać próbki w ten sam sposób. Jedną różnicą jest to, że naciskasz klawisz Enter, aby uzyskać chłonność. Naciśnij enter po zamknięciu pokrywy. Zapisz te wartości w notatniku.
Wykres absorbancji w stosunku do obliczonych znanych stężeń dla wszystkich próbek. Znane stężenie będzie na osi X, a absorbancja na osi Y. Najlepiej jest utworzyć wykres w programie do tworzenia wykresów komputerowych.
Użyj programu graficznego, aby obliczyć linię regresji dla wykreślonych punktów. Możliwe jest usunięcie jednego z dwóch punktów dla każdego rozcieńczenia, aby uzyskać najlepszą linię regresji. W tym celu należy wykonać każde rozcieńczenie w dwóch egzemplarzach. Im bliższa jest wartość R ^ 2, tym lepsza linia regresji. Zanotuj równanie linii regresji.
Odczytaj absorbancję nieznanego roztworu w spektrofotometrze. Zapisz tę chłonność.
Obliczyć stężenie nieznanego roztworu za pomocą równania linii regresji. Nieznana chłonność jest podstawiona jako Y w równaniu. Rozwiązujesz równanie dla X, stężenia.