Zawartość
Reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR) i jej krewny naukowy, klonowanie genów ulegających ekspresji, to dwa biotechnologiczne przełomy lat 70. i 80. XX wieku, które nadal odgrywają znaczącą rolę w zrozumieniu choroby. Obie te technologie molekularne dają naukowcom środki do wytwarzania większej ilości DNA na różne sposoby.
Historia
Biolog molekularny Kary Mullis zrewolucjonizował naukę genów, gdy pomyślał o reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) wiosną 1983 r., Która przyniosła mu Nagrodę Nobla w dziedzinie chemii w 1993 r. Ten przełom nastąpił w wyniku badań nad klonowaniem, które sięgają 1902 roku. Do listopada 1951 roku nie nastąpił żaden znaczący postęp w klonowaniu, kiedy to zespół naukowców z Filadelfii sklonował embrion żaby. Wielki przełom nastąpił 5 lipca 1996 r., Kiedy naukowcy sklonowali „Dolly” jagnięcinę z zamrożonej komórki sutka.
PCR i klonowanie
Klonowanie to po prostu tworzenie jednego żywego organizmu z drugiego, tworząc dwa organizmy o tych samych dokładnych genach. PCR umożliwia naukowcom wyprodukowanie miliardów kopii fragmentu DNA w ciągu kilku godzin. Chociaż PCR wpływa na technologię klonowania, wytwarzając duże ilości DNA, które można sklonować, PCR napotyka trudność zanieczyszczenia, w której próbkę z niepożądanym materiałem genetycznym można również replikować i wytworzyć niewłaściwe DNA.
Jak działa PCR
Proces PCR obejmuje rozkład DNA poprzez podgrzanie go, co rozwija podwójną helisę DNA w oddzielne pojedyncze nici. Po oddzieleniu tych nici enzym zwany polimerazą DNA odczytuje sekwencję kwasu nukleinowego i wytwarza podwójną nić DNA. Proces ten powtarza się wielokrotnie, podwajając ilość DNA w każdym cyklu i zwiększając wykładniczo DNA do momentu utworzenia milionów kopii oryginalnego DNA.
Jak działa klonowanie
Klonowanie DNA obejmuje najpierw izolację źródła i wektora DNA, a następnie użycie enzymów do cięcia tych dwóch DNA.Następnie naukowcy wiążą źródłowe DNA z wektorem za pomocą enzymu ligazy DNA, który naprawia splot i tworzy pojedynczą nić DNA. To DNA jest następnie wprowadzane do komórki organizmu gospodarza, gdzie rośnie wraz z organizmem.
Aplikacje
PCR stało się standardowym narzędziem w kryminalistyce, ponieważ może zwielokrotniać bardzo małe próbki DNA do testów w wielu laboratoriach przestępczych. PCR stało się również przydatne dla archeologów do badania biologii ewolucyjnej różnych gatunków zwierząt, w tym próbek sprzed tysięcy lat. Technologia klonowania znacznie ułatwiła izolację fragmentów DNA zawierających geny do badania funkcji genów. Naukowcy uważają, że niezawodne klonowanie można wykorzystać do zwiększenia produktywności rolnictwa poprzez replikację najlepszych zwierząt i upraw, a także do zwiększenia dokładności badań medycznych poprzez zapewnienie zwierzętom testowym, które wszystkie reagują w ten sam sposób na ten sam lek.