Zawartość
Naukowcy i badacze badają wzrost bakterii, przygotowując kultury w laboratorium. Szalki Petriego zawierające pożywkę agarową hodują kultury bakteryjne po jednym przeciągnięciu lub zaszczepieniu. Uczniowie mogą przygotować agar odżywczy w domu, korzystając z zapasów ze sklepów spożywczych lub ze zdrową żywnością dla projektu Science Fair. Konwencjonalne urządzenia kuchenne i podstawowe przybory kuchenne zapewniają narzędzia do przygotowania sterylnego podłoża hodowlanego, które można dozować do szalek Petriego. Przestrzeganie sterylnych technik poprzez podgrzewanie materiałów oraz utrzymywanie powierzchni w czystości i suchości poprawi wyniki, zapobiegając zanieczyszczeniu kultury przez pleśń i cząsteczki.
Umieść filtr do kawy w sitku i zawieś sitko nad otworem przezroczystej miski.
Powoli wlej bulion do filtra, upewniając się, że bulion nie wylewa się z boków filtra. Jeśli filtr zostanie zatkany cząstkami, usuń zużyty filtr, zastąp go czystym filtrem i kontynuuj nalewanie bulionu.
Wyjmij sitko i filtr z góry miski i obserwuj, czy bulion wydaje się przezroczysty (tj. Nie ma zawieszonych cząstek w cieczy). Jeśli cząstki unoszą się w cieczy, powtórz kroki 1 i 2, używając drugiej przezroczystej miski i świeżego filtra do kawy.
Umieść garnek na kuchence i wlej do niego przezroczysty bulion.
Dodaj 16 uncji wody destylowanej do garnka zawierającego bulion.
Włącz piec i ustaw ciepło na średnio-niskim. Podgrzej bulion do wrzenia (tj. Małe bańki pojawią się w pobliżu boku garnka).
Dodaj 1 łyżeczkę proszku agar-agar do gotującego się bulionu (około 2,5 gramów) i mieszaj mieszaninę, aż proszek się rozpuści. Pamiętaj, aby zamieszać proszek, aby się rozpuścił i aby żelatyna nie opadła na dno garnka (gdzie może się palić).
Powtarzaj krok 7, aż cały proszek agar-agar zostanie rozpuszczony w bulionie.
Kontynuuj mieszanie bulionu przez około 1 minutę, aby upewnić się, że cały proszek całkowicie się rozpuścił.
Wyłącz piec, połóż pokrywkę na garnku i pozwól cieczy ostygnąć przez co najmniej 15 minut.
Ułóż sterylne szalki Petriego w rzędzie, aby ułatwić ich montaż, ale nie usuwaj pokrywek. W razie potrzeby umieść trójnóg, aby przytrzymać ciepły garnek. Jeśli zamiast szalek Petriego używasz kubków z kremem, sterylizuj kubki z kremem, umieszczając kubki i pokrywki odwrócone (do góry nogami) na pokrytym folią biszkopcie i piecz w piekarniku przez co najmniej godzinę w temperaturze 375 stopni Fahrenheita. Przed użyciem upewnij się, że sterylizowane kubki i pokrywki są całkowicie schłodzone.
Ostrożnie dotknij zewnętrznej części doniczki, aby sprawdzić, czy jest ciepła w dotyku i umieść doniczkę na trójnożku. Jeśli garnek jest zbyt gorący, aby go dotknąć, poczekaj co najmniej 10 minut, aż ostygnie.
Zdejmij pokrywkę i odłóż na bok. Umieść kadzi w garnku.
Zdejmij pokrywkę z jednej szalki Petriego i nalej bulion odżywczy, aby wypełnić szalkę do połowy. Natychmiast przykryj naczynie pokrywką.
Powtórz krok 14 dla każdej szalki Petriego.
Pozwól bulionowi odżywczemu zestalić się na szalkach Petriego przez co najmniej 1 godzinę bez żadnych zakłóceń.
Delikatnie potrząśnij szalkami Petriego na boki, aby sprawdzić, czy bulion odżywczy całkowicie się zestalił. Jeśli bulion nie jest całkowicie zżelowany, odczekaj kolejne 20 minut przed ponownym sprawdzeniem.
Przykryj stół lub płaską powierzchnię rolką ręczników papierowych, aby stworzyć sterylne miejsce do pracy. Oderwij ręcznik papierowy i złóż go cztery razy, aby utworzyć grubą, prostokątną zwój. Ustaw ten zwój na jednym końcu obszaru roboczego.
Przenieś jedną szalkę Petriego do sterylnego obszaru roboczego i zdejmij pokrywkę. Ostrożnie odwróć naczynie i umieść jeden koniec z boku złożonego zwitka, tak aby leżał odwrócony i lekko pochylony (z niewielką szczeliną przy zwiniętym ręczniku papierowym).
Odwróć pokrywkę i umieść ją nad szalką Petriego na sterylnej powierzchni roboczej. Jeśli na pokrywce pojawią się krople wody, delikatnie strząśnij tę wilgoć przed umieszczeniem na zakrytej powierzchni, ale nie dotykaj wnętrza pokrywki.
Powtórz kroki 19 i 20 dla każdej szalki Petriego, umieszczając jedną stronę odwróconej szalki na boku poprzedniej szalki zamiast zwitka papierowego ręcznika. Naczynia pojawią się jako zestaw naprzemienny, z przerwami po jednej stronie, aby nadmiar wilgoci mógł odparować.
Spójrz na odwrócone płytki Petriego, aby sprawdzić, czy wilgoć po bokach płytek odparowała. Po usunięciu całej wilgoci obróć płytki prawą stroną do góry i natychmiast przykryj pokrywkami do użycia.
Zaszczepić agar odżywczy na płytce, wycierając wacik zawierający pożądaną kulturę na powierzchni agaru odżywczego przed przykryciem pokrywką. Odwróć szalkę Petriego, aby ciało stałe było na wierzchu. Zaszczepioną szalkę Petriego należy przechowywać z ciałem stałym na górze do hodowli, a pokrywką na dnie, aby wychwycić wilgoć, luźne cząsteczki lub wzrost.