Zawartość
Chociaż nie można ich zobaczyć gołym okiem, bakterie są wszędzie. Istnieją w żywności, glebie, wodzie, powierzchniach w naszych domach oraz w naszych ciałach. Bakterie ogólnie występują w mieszanych populacjach. Izolacja konkretnej bakterii z innych gatunków bakterii w danej próbce pozwala mikrobiologom zbadać jej strukturę i funkcję oraz cechy użyte do jej identyfikacji. Mikrobiologowie często izolują bakterie za pomocą jednej z kilku technik płytek smugowych.
Przybory
Pętla inokulacyjna służy do przenoszenia mikroorganizmów. Składa się z nichromu lub drutu platynowego z małą, okrągłą pętlą na jednym końcu. Drugi koniec jest prosty i wsuwa się w uchwyt. Dostępne są również plastikowe jednorazowe pętle do inokulacji. Bakterie można izolować tylko wtedy, gdy rosną. Mikrobiologowie hodują bakterie do izolacji płytki smugowej w płytkich, okrągłych płytkach Petriego wypełnionych stałym podłożem, zwanym agarem. Agar naśladuje środowisko, w którym bakterie naturalnie rosną. Naczynia wypełnione pożywkami są sterylne i przykrywane, aby zapobiec rozwojowi niepożądanych organizmów. Podczas izolacji płytki smugowej pętla inokulacyjna jest wielokrotnie sterylizowana w płomieniu palnika Bunsena.
Zasada
Technika płytki smugowej jest najpopularniejszą metodą izolowania określonych bakterii z próbki zawierającej mieszaninę mikroorganizmów. Technika zasadniczo rozcieńcza liczbę organizmów i zmniejsza ich gęstość. Pozwala mikrobiologom rozróżniać i izolować poszczególne kolonie bakteryjne. Kolonia jest widoczną gromadą bakterii. Wszystkie bakterie w jednej kolonii pochodzą z tej samej komórki bakteryjnej. W związku z tym poszczególne kolonie są „czystymi” koloniami. Czysta kolonia jest przenoszona na inną płytkę w celu wytworzenia czystej kultury składającej się z jednego rodzaju bakterii.
Procedura
Po prawidłowym wykonaniu izolacja płytki pasmowej rozrzedza próbkę i umożliwia rozwój poszczególnych komórek bakteryjnych w izolowane kolonie. Mikrobiolog zaczyna od sterylizacji pętli inokulacyjnej w płomieniu. Ochładza pętlę, dotykając jej na agarze, a następnie zanurza pętlę w próbce i rozprowadza ją tam iz powrotem, aby zakryć część płytki. Sterylizuje pętlę, chłodzi ją i zaszczepia drugą sąsiednią sekcję płytki, przeciągając pętlę przez pierwszą sekcję kilka razy i zakrywając drugą sekcję ruchem zygzakiem. To pobiera niewielką liczbę bakterii z pierwszej sekcji i przenosi je do drugiej sekcji. Liczba powtórzeń tej podstawowej procedury zależy od zastosowanej metody płytki smugowej. Pomimo tej metody oryginalna próbka służy do zaszczepienia tylko pierwszego odcinka płytki.
Metoda płytki smugowej
Metody płytek pasmowych różnią się w zależności od liczby pasm agarowych. Metoda T-Streak wykorzystuje trzy sekcje: górną połowę i dwie jednakowe wielkości dolne sekcje. Inokulum początkowe umieszcza się w górnej połowie płytki. Bakterie są przeciągane z górnej sekcji do jednej z dolnych sekcji, a następnie z tej dolnej sekcji do drugiej. W metodzie kwadrantowej cztery odcinki o jednakowej wielkości są z pasami. Metoda ciągłego pasmowania zazwyczaj obejmuje zaszczepianie górnej połowy płytki, obracanie jej o 180 stopni i zaszczepianie drugiej połowy płytki bez sterylizacji pętli lub wyciągania bakterii z poprzedniej sekcji.